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聚合酶链反应技术

百岁啦体检网 • 2016.07.19 10:50


  聚合酶链反应技术

  聚合酶链反应技术简介:聚合酶链反应技术诊断幽门螺旋杆菌是否存在仅需微量的DNA,而不需要活菌存在(这不同于其他幽门螺旋杆菌检测方法),它不仅可以检测胃内幽门螺旋杆菌,还可望检出胃以外部位,如牙斑、粪便内的幽门螺旋杆菌,还可用于流行病学调查,它的敏感性远远超过了其他方法,有利于确定细菌感染的来源及途径,它是一种很有前途的幽门螺旋杆菌检测方法。

  检查部位:胃

  空腹检查:是

  聚合酶链反应技术注意事项

  不适宜人群:(1)凝血功能差者。

  (2)胃血管瘤(质软)。

  检查前禁忌:1.检查前一天避免吸烟,以免检查时因咳嗽影响插管。

  2.要有成人亲友陪伴,术前取下假牙。

  3.检查前一天晚饭后不应再吃东西,检查当天早晨不应再喝水。

  检查时禁忌:1.告知医生您的既往病史及药物过敏史。

  2.嘱病人在操作中不要做过多的吞咽动作,防止唾液吸入气道及引起喉头疼痛。

  3.向病人说明胃镜检查的目的,鼓励病人树立信心,勿紧张,配合医生顺利完成检查。抽取胃粘膜检查即可。

  4.准备好基因片段,保证电泳完成。

  聚合酶链反应技术检查过程

  1.材料:标本采自经胃镜检查确诊的胃、十二指肠溃疡、各类胃炎及溃疡合并胃炎病例,在距幽门口5cm内钳取胃粘膜2份(每例检查前2周停用抗HP药物),分别作PCR及病理切片检查,检测HP。

  2.研究方法:PCR技术:采用厦门长城生物工程有限公司生产的HPDNAPCR诊断试剂盒,DNA抽提采用水煮沸法,引物为尿素酶基因片段,其核着酸顺序为:引物1为5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT―3',引物2为5'-TTATTACGCTTC―3',扩增产物为456bP,94℃预变性5分钟,94℃30秒,55℃30秒,72℃1分钟共32个循环,72℃延伸5分钟,2%琼脂糖凝胶电电泳20分钟, BE染色在456bp出现条带为阳性, 根据阳性带亮度分别作、定量判断。

  指标解读

  正常

  异常

  正常:测定Hp无有关毒力因子基因的mRNA(信使核糖核酸)得存在。

                                                                       
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